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你知道關(guān)于兔肌動蛋白的基礎(chǔ)知識都有哪些嗎

更新時間:2021-09-09      點擊次數(shù):1516

    兔肌動蛋白,分子量:43kDa。普遍存在于各類細胞的細胞核中,是肌肉結(jié)構(gòu)蛋白的一種,肌原纖維細絲中的主要成分。它是由一條多肽鏈組成,分子構(gòu)型呈球形,有方向性,一般稱球狀肌動蛋白(G-肌動蛋白)。

    兔肌動蛋白(ActinFromRabbitMuscle)的產(chǎn)品詳情:

    1.DNA帶模糊

    1)DNA降解:避免核酸酶污染;

    2)電泳緩沖液陳舊:電泳緩沖液多次使用后,離子強度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果。建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;

    3)所用電泳條件不合適:電泳時電壓不應超過20V/cm,溫度<30℃;巨大DNA鏈電泳,溫度應<15℃;核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力;

    4)DNA上樣量過多:減少凝膠中DNA上樣量;

    5)DNA樣含鹽過高:電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽;

    6)兔肌動蛋白(ActinFromRabbitMuscle)有蛋白污染:電泳前酚抽提去除蛋白;

    7)DNA變性:電泳前勿加熱,用20mMNaCl緩沖液稀釋DNA。

    2.不規(guī)則DNA帶遷移

    1)對于λ/HindIII片段cos位點復性電泳前于65℃加熱DNA5分鐘,然后在冰上冷卻5分鐘;

    2)電泳條件不合適:電泳電壓不超過20V/cm;溫度<30℃;經(jīng)常更換電泳緩沖液;

    3)DNA變性:以20mMNaClBuffer稀釋DNA,電泳前勿加熱。

    3.帶弱或無DNA帶

    1)DNA的上樣量不夠:兔肌動蛋白(ActinFromRabbitMuscle)增加DNA的上樣量;聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高,上樣量可適當降低;

    2)DNA降解:避免DNA的核酸酶污染;

    3)DNA走出凝膠:縮短電泳時間,;

    4)對于EB染色的DNA,所用光源不合適:應用短波長(254nm)的紫外光源。

    4.DNA帶缺失
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